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流式细胞术分选小鼠肺泡巨噬细胞及鉴定

安徽医科大学学报 2017 11 v.52 1596-1600     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:31570901、81500428)

作者:韩鑫涛;赵殿元;唐丽;

关键词:肺泡巨噬细胞;;流式细胞术;;Real-time PCR;;吞噬功能

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.11.004

〔摘 要〕 目的建立一种基于流式细胞术分离小鼠肺泡巨噬细胞(AM)的方法。方法小鼠肺脏在体外经胶原酶IV消化后获得单细胞悬液,再经CD11b和CD11c抗体标记,利用流式细胞仪分选获得CD11blowCD11c+AM,并经台盼蓝染色计数细胞活力,以及通过Real-time PCR和吞噬功能进行鉴定。结果流式细胞术分选小鼠肺脏单细胞悬液,获得CD11blowCD11c+细胞,纯度为(93±2)%,细胞活力为(80±5)%;Real-time PCR结果显示过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在该群细胞高表达(P<0.001);细胞吞噬功能实验结果显示该群细胞具有较好的吞噬活性,吞噬率约为10%。结论建立了一种基于流式细胞术分选获得AM的方法,该方法获得的细胞纯度高,细胞活性好,可用于功能性实验。