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双氧化酶2在5-羟色胺加重的小鼠结肠炎模型中的表达及作用

安徽医科大学学报 2017 03 v.52 337-342     字体:

基金项目: 国家自然科学基金面上项目(编号:81370487)

作者:董仕桢;陈梦露;戴发亮;轩青霞;陈攀;冯丹丹;常永超;高强;

关键词:结肠炎;;葡聚糖硫酸钠;;双氧化酶2;;5-羟色胺;;NADPH氧化酶

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.03.007

〔摘 要〕 目的探讨5-羟色胺(5-HT)对双氧化酶2(Duox2)在小鼠结肠组织中的表达情况及其在炎症中的意义。方法选取6~8周龄的健康清洁级C57BL/6J(B6)雄性小鼠,随机分为5组(n=8):对照组自由饮用无菌蒸馏水;葡聚糖硫酸钠(DSS)(1.0%、2.5%)组自由饮用相应浓度的DSS溶液;5-HT组采用直肠灌药方式(1.0 mg/kg)给药,每3 d 1次;DSS+5-HT组同时给予1.0%DSS和5-HT。于造模第6天处死小鼠取结肠组织。通过结肠长度、疾病活动指数(DAI)评分和HE染色等方法评估肠道炎症程度,采用实时定量PCR(RT-PCR)检测小鼠结肠组织中白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α和Duox2 mRNA表达水平,应用免疫组化检测结肠组织中Duox2蛋白的表达情况。结果对照组和5-HT组小鼠无肠炎表现;DSS(1.0%)组小鼠表现为轻度肠炎;DSS+5-HT组和DSS(2.5%)组有严重急性肠炎表现。IL-1β、IL-6和TNF-α等表达量随炎症程度加重而增加。Duox2 mRNA在5-HT组和DSS(1.0%)组表达增高(均P<0.05),在DSS+5-HT和DSS(2.5%)组表达下调(均P<0.05)。免疫组化结果显示Duox2蛋白主要表达于小鼠结肠上皮刷状缘及上皮细胞胞质中,与mRNA表达一致。结论 5-HT可能通过影响Duox2的表达在小鼠结肠炎的发生发展中发挥作用。