安徽医科大学学报
2017 02 v.52 155-159
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基金项目: 国家自然科学基金(编号:81401643);;国家重点基础研究计划(编号:2015CB554202)
作者：苏莉;王建新;陈芳红;李崭;黄洁;李涛;王慧;
关键词：肠出血性大肠杆菌;;Red重组系统;;三型分泌系统
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.02.001
〔摘 要〕 目的采用Red重组方法敲除肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7 z0986和z1444基因,构建双缺失突变株。方法首先构建z0986、z1444打靶片段;其次以电击法转化感受态细胞,之后通过PCR鉴定所得菌株;最终所得阳性单克隆测定生长曲线。结果 z1444单基因缺失突变株(Δz1444/933)及z0986-z1444双基因缺失突变株(Δz0986/Δz1444/933)构建成功,其生长曲线与野生型EHEC O157∶H7差异均无统计学意义。结论 z0986与z1444基因缺失对EHEC的生长无影响。构建Δz1444/933及Δz0986/Δz1444/933为深入研究z1444基因的功能及作用机制奠定了基础。