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作者:常见荣;魏练平;王荣海;宋礼华;
关键词:重组人生长激素;;胃癌;;MGC803;;生长激素受体;;JAK-STAT3通路
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.10.004
〔摘 要〕 目的探究重组人生长激素(rhGH)对人胃癌MGC803细胞生长的影响。方法采用Western blot法检测MGC803与MKN45两种胃癌细胞生长激素受体(GHR)蛋白的表达以及实时定量PCR(qRT-PCR)法检测二者GHR mRNA的相对表达量。采用MTT法检测在无血清同步24 h、3%胎牛血清(FBS)给药培养基条件下,不同浓度rh GH作用不同时间对MGC803细胞增殖的影响。采用流式细胞术及Western blot法测定不同浓度的rh GH对MGC803细胞周期及相关信号通路节点蛋白表达的影响。结果 Western blot与qRT-PCR结果表明,MGC803细胞在蛋白以及mRNA水平都被验证为GHR阳性表达的细胞株,具有发挥作用的生物学基础。MTT结果表明,在含3%FBS的给药培养基条件下,不同浓度的rh GH对MGC803细胞有促增殖作用,但不同rh GH浓度组之间差异无统计学意义。细胞周期的结果表明,与对照组比较,rh GH给药组增殖指数(PI)升高。Western blot结果显示,在rh GH作用下,磷酸化酪氨酸蛋白激酶2(p-JAK2)、磷酸化信号转导和转录活化因子3(p-STAT3)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)等信号蛋白表达上调。结论在3%FBS培养条件下,rh GH促进MGC803细胞增殖,与激活JAK2-STAT3通路、上调下游p-AKT及p-ERK的表达有关。