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流式细胞术检测IgD与IgD受体结合实验方法的建立

安徽医科大学学报 2016 08 v.51 1105-1110     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81330081;81173075;81202596);;安徽医科大学“青年拔尖人才支持计划”项目;;高等学校博士学科点专项科研基金(编号:20113420120006;20123420110003);;安徽省科技攻关计划项目(编号:1301042098);;安徽省自然科学基金青年项目(编号:1408085QH173)

作者:陈恒石;吴育晶;黄琼;陈文生;董进;魏伟;

关键词:配体受体结合;;亲和力;;IgD;;荧光标记

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.08.007

〔摘 要〕 目的建立非放射性荧光标记的配体受体结合实验,检测Ig D与其受体结合的作用特性。方法以配体受体结合理论为基础,利用荧光标记抗体技术,建立非放射性配体受体结合实验方法。利用流式细胞术检测人CD4+T细胞和人滑膜细胞上Ig D与Ig D受体结合的亲和力。结果人CD4+T细胞上Ig D与Ig D受体结合的解离常数(KD)和受体最大结合容量(Bmax)分别是8.10×10-10mol/L和6 605相对值/104细胞,人滑膜细胞上Ig D受体与Ig D结合的KD和Bmax值分别是7.02×10-10mol/L和5 977相对值/104细胞。结论该方法避免了传统受体与配体结合分析中放射性标记的问题,操作简便、稳定性好、灵敏度及选择性均较高,可为分析配体受体结合提供新的方法。