基金项目: 国家自然科学基金联合项目(编号:U1204821);国家自然科学基金面上项目(编号:81572794)
作者:王小利;许德英;刘刚;常永超;
关键词:乳腺癌;;SETDB1;;基因沉默;;细胞增殖;;细胞迁移
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.08.002
〔摘 要〕 目的研究组蛋白甲基化酶SETDB1在乳腺癌中的表达情况及对其癌细胞株增殖和迁移能力的影响。方法采用RT-PCR、Western blot和IHC方法检测38例乳腺癌与癌旁组织及癌细胞株中SETDB1的表达水平;采用稳定转染方法筛选出沉默SETDB1基因的克隆细胞株,采用CCK-8、软琼脂克隆形成及流式细胞术检测沉默SETDB1后对肿瘤细胞增殖能力的影响;采用Transwell方法检测沉默后对肿瘤细胞迁移能力的影响。结果 38例乳腺癌与癌旁组织中23例癌组织、13例癌旁组织阳性表达(P<0.05),SETDB1的mRNA水平相对表达量分别为(1.20±0.08)、(0.96±0.05)(t=2.44,P<0.05);沉默T47D中SETDB1基因后,GFP、sh2、sh4株形成克隆个数分别是(70.00±2.00)、(42.67±1.53)和(13.33±1.53)个(F=834.00,P<0.001);细胞周期中sh2株出现了G0/G1期阻滞,而sh4株出现了G2/M期阻滞(P<0.01);48 h穿膜个数分别是(54.25±1.71)、(16.50±1.29)、(9.00±0.82)个(F=1344.00,P<0.001)。结论 SETDB1在乳腺癌中高表达,沉默该基因可影响癌细胞株的增殖和迁移能力,有望作为乳腺癌诊断及治疗的新靶点。