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慢病毒介导的FoxA1高表达对乳腺癌MCF-7细胞株增殖凋亡探究

安徽医科大学学报 2016 06 v.51 822-827     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:1308085QH152)

作者:郑璐;汤铜;钱波;周连帮;万圣云;张磊;史加宁;李佳;

关键词:Fox A1;;慢病毒载体;;MCF-7;;增殖凋亡

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.06.014

〔摘 要〕 目的利用慢病毒载体,构建乳腺癌MCF-7高表达Fox A1细胞株,并初步探究Fox A1对乳腺癌MCF-7细胞株增殖凋亡的影响。方法将Fox A1基因重组构建慢病毒载体穿梭质粒EX-Z1010-LV201,经PCR和测序后在脂质体Lipofectamine2000介导下转染293T细胞包装慢病毒,嘌呤霉素筛选出稳定转染的细胞,Real-Time PCR法检测稳定转染MCF-7细胞株中Fox A1基因的表达水平,MTT及流式细胞术对比高表达Fox A1细胞株与对照细胞株增殖凋亡差异。结果 PCR扩增和测序结果证实成功构建Fox A1慢病毒载体并包装慢病毒,成功筛选出Fox A1高表达的乳腺癌MCF-7细胞系。MTT及流式细胞术结果显示:与对照组比较,上调Fox A1乳腺癌MCF-7细胞株增殖下降,凋亡率增加。结论成功构建了重组慢病毒载体,并筛选出稳定高表达Fox A1的MCF-7细胞株,Fox A1可能参与了乳腺癌MCF-7细胞株增殖凋亡调控,为下一步进行其机制探讨提供了依据。