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多重实时PCR检测腹膜透析相关性腹膜炎致病菌的应用分析

安徽医科大学学报 2016 05 v.51 712-717     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金资助(编号:1408085MH183)

作者:燕雯雯;沈继录;李晓峰;吴永贵;

关键词:腹膜透析相关性腹膜炎;;致病菌;;实时荧光PCR;;传统培养

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.05.023

〔摘 要〕 目的探讨多重实时PCR(RT-PCR)检测腹膜透析相关性腹膜炎(PDAP)致病菌的应用价值。方法收集70例患者的腹透液标本,分别行传统细菌培养与荧光染料法细菌通用引物RT-PCR检测。根据70例样本培养结果及相关参考文献,选取最常见的6种PDAP致病菌作为检测菌,设计各检测菌特异引物,分别采用单一及多重荧光探针法RTPCR,针对通用RT-PCR法检出的阳性样本进行检测。结果70例标本中传统培养46例阳性,阳性率为65.71%;通用RT-PCR法57例阳性,阳性率为81.43%,两种检测方法阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。在6种常见致病菌检测中,对通用RT-PCR法检出的57例阳性样本行单一及多重RT-PCR检测,两者均检出38例样本在6种检测菌范围内,两种方法检测结果一致,1例RT-PCR结果与培养结果不符,剩余19例菌种在6种检测菌范围以外。通用RT-PCR可在4~6 h内明确是否存在细菌感染;针对6种致病菌的检测,单一RT-PCR可在6~9 h内完成,多重RT-PCR仅需3h即可明确菌种。结论与传统培养法比较,RT-PCR方法有较高灵敏性和特异性,多重RT-PCR因可同时检测多种致病菌,较单一RT-PCR更加迅速、简便、经济。