〔摘　要〕 目的构建甲羟戊酸激酶(MVK)基因真核及shRNA表达载体并转染至Bx PC-3细胞中,观察其对细胞周期蛋白的影响。方法从Bx PC-3细胞中提取总RNA,逆转录PCR(RT-PCR)法获得目的基因MVK以及通过化学合成MVK(751~779)和MVK(1 089~1 117)位点寡核苷酸片段,构建真核表达及shRNA表达载体并转染至Bx PC-3细胞,筛选稳定表达细胞系。Western blot法分析转染后对Bx PC-3细胞周期蛋白的影响。结果成功获得MVK基因真核表达(pc DNA3.1-mvk)及两个针对MVK shRNA表达载体(pi LentiRNAi-shRNA1/2)。通过抗生素筛选及Western blot分析获得了稳定的MVK过表达及低表达细胞株。Western blot分析显示:过表达MVK的细胞株及MVK knockdown的细胞株中细胞周期蛋白Cyclin B1、Cyclin E表达量与正常及对照细胞相比均显著降低。结论 MVK过表达及低表达均抑制BxPC-3细胞周期蛋白Cyclin B1、Cyclin E的表达。