安徽医科大学学报
2016 01 v.51 1-4
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基金项目: 国家自然科学基金(编号:81271837);;安徽高校省级自然科学研究项目(编号:KJ2012A161);;安徽医科大学博士科研经费资助项目(编号:XJ200914)
作者：陈伟;方圆;汪小五;许常青;朱晨辰;杨宇;张龙龙;王林定;
关键词：卡波氏肉瘤相关疱疹病毒;;K15基因;;多克隆抗体
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.01.001
〔摘 要〕 目的制备卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)K15蛋白多克隆抗体,并将其应用于细胞内K15蛋白的检测。方法选择K15基因第8个外显子(K15P_(ex8))序列做为模板,构建K15P_(ex8)的表达载体p QE-80L-K15P_(ex8)。诱导重组菌蛋白表达,免疫新西兰兔,制备抗K15P_(ex8)多克隆抗体,并用间接ELISA法测定抗体效价。将p FJ和p FJ-K15P两种重组质粒分别转入HEK 293T细胞,用Western blot法检测抗K15P_(ex8)多克隆抗体对K15P-Flag蛋白的识别。结果由K15P_(ex8)制备的抗K15P_(ex8)多克隆抗体效价大于1∶6 400,能特异性识别重组质粒p FJ-K15P转染293T细胞产生的K15P-Flag融合蛋白。结论初步证明K15P_(ex8)蛋白有免疫反应性,该多克隆抗体可用于重组的K15P-Flag融合蛋白的检测。