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miRNA-4465过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移侵袭的影响及其机制

安徽医科大学学报 2015 11 v.50 1570-1574     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:11040606M180)

作者:骆广涛;王本忠;

关键词:miRNA-4465;;EZH2;;乳腺肿瘤;;转移

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2015.11.009

〔摘 要〕 目的探讨miRNA-4465的过表达对乳腺癌MDAMB-231细胞迁移侵袭能力的影响及机制。方法将miRNA-4465的模拟物(minics)转染入MDA-MB-231细胞,通过实时定量PCR检测miRNA-4465的表达变化;运用Transwell实验检测转染后细胞迁移和侵袭能力的改变。采用生物信息学技术预测miRNA-4465的潜在靶基因,并通过荧光报告载体实验及Western blot加以证实。结果与阴性对照组相比,转染miRNA-4465 minics组miRNA-4465表达水平明显升高(P=0.001)。Transwell迁移实验结果显示转染miRNA-4465 minics组细胞迁移能力减弱(P=0.001);Transwell侵袭实验结果显示转染miRNA-4465 minics组细胞侵袭能力降低(P=0.010)。通过生物信息学技术预测了EZH2为miRNA-4465的潜在靶基因;荧光报告载体实验结果显示转染miRNA-4465 minics+psi CHECK2-EZH2 3’UTR(野生型)后荧光素酶活性较转染阴性对照序列(NC)+psi CHECK2-EZH2 3’UTR(野生型)降低66%(P=0.001)。此外将miRNA-4465转染入MDA-MB-231细胞后EZH2蛋白表达降低。结论 miRNA-4465能降低MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力,这个过程可能是通过调控EZH2基因的表达实现的。