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靶向抑制DNMT1对人脑胶质瘤细胞增殖的影响

安徽医科大学学报 2015 06 v.50 740-744     字体:

基金项目: 国家自然科学基金青年基金(编号:81402078);国家自然科学基金面上项目(编号:81072066);;安徽省自然科学基金(编号:1508085MH194)

作者:李佳;卞尔保;贺小军;马春春;宗钢;王洪亮;赵兵;

关键词:胶质瘤;;基因;;转染;;细胞增殖

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2015.06.005

〔摘 要〕 目的应用靶向DNA甲基转移酶1(DNMT1)基因的小干扰RNA(siRNA)重组质粒来转染体外培养的人脑胶质瘤细胞,观察其对胶质瘤细胞增殖活性的影响。方法实验组予以siRNA-DNMT1序列进行转染,对照组仅予以siRNA-阴性对照序列。应用qRT-PCR分析DNMT1基因表达变化,Western blot法分析DNMT1、PCNA和Cyclin D1蛋白表达变化,MTT法检测细胞增殖生长能力,细胞克隆法分析细胞增殖克隆形成能力。结果与对照组比较,qRT-PCR结果表明实验组DNMT1 mRNA表达明显减少(P<0.01);Western blot法表明实验组DNMT1、PCNA和Cyclin D1蛋白表达水平明显降低(P<0.01);MTT法检测表明实验组中活细胞数明显低于对照组(P<0.05);细胞克隆法表明实验组细胞的增殖克隆形成能力明显低于对照组(P<0.01)。结论靶向DNMT1基因的siRNA重组质粒可减少人脑胶质瘤细胞内DNMT1基因的表达,从而抑制胶质瘤细胞的增殖。