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鞘碱性蛋白活化的SD大鼠T细胞培养与鉴定

安徽医科大学学报 2015 01 v.50 4-8     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81071268、81271363)

作者:赵皓;余晾;张敬星;陈月娟;吕合作;王保龙;

关键词:髓鞘碱性蛋白;;淋巴细胞;;免疫;;流式细胞术

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2015.01.002

〔摘 要〕 目的培养针对髓鞘碱性蛋白(MBP)特异的SD大鼠T淋巴细胞,对其表型和细胞因子分泌特征进行鉴定。方法将MBP免疫SD大鼠,收集回流淋巴结,制备成单细胞悬液,在RMPI 1640培养液中用MBP反复刺激获得MBP特异性T细胞(MBP-T)。然后用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定其对MBP刺激的反应性,用流式细胞术鉴定其表型和细胞因子的产生。结果当MBP抗原存在的情况下,MBP-T的3H-TdR掺入量明显增加。流式细胞术检测表明MBP-T主要为CD3+CD4+的T淋巴细胞(98%),并可以产生干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素10(IL-10)等细胞因子。结论 MBP免疫SD大鼠的回流淋巴结细胞,经过体外扩增可以获得MBP特异性的T细胞,其表型主要为CD3+CD4+,并可以产生Th1和Tr1型细胞因子。