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FACSAria流式细胞仪无菌操作分选高纯度细胞亚群

安徽医科大学学报 2014 12 v.49 1811-1815     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81201964)

作者:刘锡娟;丁慧荣;田志华;韩海勃;张宏;

关键词:流式细胞仪;;无菌分选;;高纯度

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2014.12.031

〔摘 要〕 BGC823细胞瞬时转染绿色荧光蛋白(GFP)质粒2 d后,用FACSAria流式细胞仪分选GFP阳性和阴性BGC823细胞亚群,检测其分选纯度并培养分选后细胞,观察其无菌生长状态;商品化FITC直标抗体孵育SMMC7721细胞后,FACSAria流式细胞仪分选FITC阳性和阴性细胞亚群。将所有分选的细胞进行培养检测无菌状态,并观察细胞生长情况。FACSAria流式细胞仪分选得到的GFP阳性细胞群的分选纯度达99.6%,GFP阴性细胞群的分选纯度达98.8%,同时激光共聚焦荧光显微镜显示分选后的GFP阳性细胞明显富集;分选后的BGC823细胞和SMMC7721细胞常规培养,细胞均无污染且生长状态良好。