基金项目: 国家自然科学基金(编号:81000681、81000177)
作者:张爱霞;余伟华;王涛;
关键词:骨髓间质干细胞;;蛋白质组学;;成骨分化;;质谱鉴定;;生物信息学
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2014.12.008
〔摘 要〕 目的比较人骨髓间质干细胞(h MSCs)诱导成骨分化过程中的蛋白质组差异,寻找h MSCs成骨分化相关蛋白质。方法体外培养h MSCs并诱导成骨分化,收集h MSCs和成骨诱导分化3 d的细胞的全蛋白,应用双向凝胶电泳(2-DE)分离和图像分析软件进行蛋白质点的识别和检测,通过比较蛋白质组学技术找出凝胶上差异2.0倍以上的蛋白质点,应用基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和生物信息学方法对差异蛋白点进行蛋白质的鉴定和分析。结果 h MSCs在体外成功诱导成骨分化,通过2-DE分离、MALDI-TOF-MS分析和生物信息学方法鉴定出了38种差异蛋白,其中22种蛋白质在成骨诱导3 d后表达明显上调,16种蛋白质在成骨诱导3 d后表达明显下调。利用Gene Ontology对所鉴定的蛋白质按分子功能和生物学途径进行分析显示,参与体内代谢、发育过程、催化反应和酶调节活性的蛋白质分别占29%、32%、44%、16%。结论蛋白质组学较好地显示了h MSCs诱导成骨分化过程中的蛋白质表达差异,这为进一步阐明h MSCs成骨分化的分子机制提供了新的思路。