安徽医科大学学报
2014 09 v.49 1250-1253
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基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:11040606M170、11040606M164)
作者:张姗靖;王蓓华;龚芮;潘林鑫;耿慧武;刘晓颖;邓松华;范礼斌;
关键词:FKBP25;;基因表达;;免疫荧光;;细胞定位
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2014.09.015
〔摘 要〕 目的研究FKBP25缺失突变体蛋白在细胞内的表达和定位。方法以人FKBP25全长cDNA序列的质粒为模板,PCR方法分别扩增出FKBP25缺失突变体序列,然后插入真核表达载体pcDNA3.1中,通过Western blot方法和免疫荧光方法检测其在细胞株中的表达和定位。结果成功构建了FKBP25缺失突变体的真核表达载体,经Western blot检测FKBP25缺失突变体在HEK 293T细胞中能够有效表达,免疫荧光显微镜结果显示FKBP25缺失突变体在COS7细胞中分布于细胞核和细胞质。结论 FKBP25缺失突变体在HEK 293T、COS7细胞中能够表达,为了解FKBP25缺失突变体的功能提供了一定基础。