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鼠IL-6受体融合蛋白的表达及初步鉴定

安徽医科大学学报 2014 08 v.49 1088-1091     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:30972569)

作者:程海燕;高闻达;任翠平;刁玉洁;杨菲;平春光;李冬冬;沈际佳;

关键词:IL-6受体;;杆状病毒;;蛋白表达

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2014.08.014

〔摘 要〕 目的构建以及表达鼠白介素6(IL-6)受体融合蛋白。方法采用基因重组技术将鼠IL-6受体融合基因克隆到杆状病毒质粒Bacmid上,重组杆状病毒质粒在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf9,转染后收集重组杆状病毒,采用空斑实验检测第3代重组杆状病毒的滴度,并通过Western blot来确定目的蛋白的表达。结果重组杆状病毒质粒在DH10Bac大肠杆菌中包装成功,并转染Sf9细胞后得到重组杆状病毒,第3代重组杆状病毒的滴度为5×107pfu/ml,Western blot表明目的蛋白在Sf9细胞中表达。结论成功表达了鼠IL-6受体融合蛋白,为进一步研究IL-6在炎症性疾病中的作用奠定了实验基础。