基金项目: 国家自然科学基金(编号:81072686、81273526、81102493);;高等学校博士学科点专项科研基金(编号:20103420120001);;安徽医科大学2013年国家级大学生创新创业训练计划(编号:201310366030)
作者:李晓慧;李俊;黄艳;黄成;王雅蕊;王欢;孙仕伟;黄蒙蒙;
关键词:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体;;肝星状细胞;;内质网应激;;凋亡;;Caspase-12
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2014.07.001
〔摘 要〕 目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)与内质网应激(ERS)相关蛋白对大鼠肝星状细胞系(HSC-T6)凋亡的影响及内在联系。方法体外血小板源性生长因子(PDGF)诱导活化的肝星状细胞(HSC),再分别加入TRAIL与ERS诱导剂衣霉素(TN)处理后,Hoechst33258染色和流式细胞仪检测细胞凋亡变化;RT-PCR法检测mRNA的表达;Western blot检测蛋白表达变化。结果与PDGF诱导活化的HSC组作为对照组比较,荧光显微镜观察到TRAIL与TN分别处理的HSC,Hoechst 33258染色细胞呈核固缩等凋亡形态变化,同流式细胞仪检测结果;与对照组相比,RT-PCR和Western blot结果显示,TRAIL组与TN组细胞凋亡基因Bax mRNA、凋亡蛋白C-Caspase-3的表达明显上调,而且ERS蛋白C-Caspase-12、CHOP、GRP78的表达均明显上调。结论 TRAIL能通过明显上调凋亡基因Bax mRNA、凋亡蛋白C-Caspase-3的表达,诱导PDGF活化的HSC凋亡,其机制可能与诱导ERS相关蛋白CHOP、GRP78、Caspase-12的表达有关。