基金项目: 安徽省高校省级自然科学研究项目(编号:ZD200907)
作者:陈杰勋;于德新;张志强;王铮;谢栋栋;王毅;张涛;陈磊;丁德茂;邹慈;闵捷;褚晗;
关键词:RNA干扰;;Eg5基因;;膀胱癌
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2014.06.011
〔摘 要〕 目的通过RNA干扰阻断T24细胞中Eg5基因的表达,研究Eg5基因对T24细胞增殖和迁移的影响。方法 T24细胞株分为3组:干扰组、空白对照组、阴性对照组。化学合成针对Eg5的小干扰RNA,通过脂质体转染至T24细胞中,应用Western blot法检测转染后T24细胞中Eg5蛋白表达,采用台盼蓝拒染实验检测细胞死亡率,用噻唑蓝(MTT)比色分析法和平板克隆形成实验检测细胞增殖抑制率,通过细胞划痕实验检测细胞的迁移能力。结果干扰组Eg5蛋白表达显著低于空白对照组和阴性对照组;干扰组细胞死亡率显著升高,与空白对照组及阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);干扰组的克隆形成率下降,与空白对照组和阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);MTT结果提示,干扰Eg5基因表达后,T24细胞的增殖率明显下降(P<0.05);划痕实验结果显示干扰组细胞迁移能力受到明显抑制(P<0.05)。结论 Eg5基因在膀胱移行细胞癌起重要作用,干扰Eg5基因能有效抑制T24细胞的增殖与迁移,促进细胞死亡,以Eg5为靶点有望成为膀胱癌基因治疗的新基因靶点。