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应用免疫磁珠分离法纯化弓形虫速殖子的研究

安徽医科大学学报 2014 01 v.49 9-13     字体:

基金项目: 国家重点基础研究发展计划资助(973计划)(编号:2010CB530001)

作者:楼研;沈继龙;程维晟;刘芳;陈鹤;罗庆礼;王林;

关键词:弓形虫;;速殖子;;纯化;;免疫磁珠分离

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2014.01.003

〔摘 要〕 目的用免疫磁珠分离法分选弓形虫速殖子,以去除宿主细胞成分,并尽可能对虫体的生物学特性无不良影响,为弓形虫的基础与临床研究提供技术基础。方法采用弓形虫Wh3株(China 1基因型)速殖子感染小鼠,提取腹腔液,常规方法制备速殖子可溶性抗原,免疫家兔,获得兔抗弓形虫多克隆IgG抗体。用抗体包被的免疫磁珠对小鼠腹腔液内弓形虫速殖子进行纯化,比较其纯度、回收率、虫体活力、毒力与感染性。结果用免疫磁珠分离技术纯化弓形虫速殖子后,其纯度提高到98.2%,细胞清除率为96%,虫体回收率为73.5%;用内盐法(MTS)细胞增殖与毒性检测试剂盒检测分离后的速殖子活性为95.6%。定量分组感染小鼠后死亡时间无显著性差异。结论免疫磁珠分离的速殖子纯度、细胞清除率和虫体回收率较高,能有效去除宿主细胞,且对速殖子的活性和毒力无影响。该法操作简便快速,无需昂贵的仪器设备,具有较大的实用价值。