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日本血吸虫无机焦磷酸酶的克隆表达及蛋白特征分析

安徽医科大学学报 2013 12 v.48 1425-1428     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:1308085MH124);; 安徽省教育厅自然科学研究重点项目(编号:KJ2011A205)

作者:曹红荣;徐云侠;丁淑琴;钟政荣;罗庆礼;沈继龙;

关键词:日本血吸虫;;无机焦磷酸酶(EC 3.6.1.1);;克隆;;蛋白特征

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.12.001

〔摘 要〕 目的克隆并原核表达日本血吸虫无机焦磷酸酶(SjIPP),分析SjIPP的蛋白特征。方法以日本血吸虫成虫cDNA为模板,克隆SjIPP,重组入pET28a质粒,并将重组质粒转化入E.coli BL21,用SDS-PAGE和Western blot法鉴定重组蛋白的表达和特异性,进一步分析SjIPP的蛋白特征和同源性。结果克隆和表达出的SjIPP均与预测的分子量大小一致,Western blot法结果显示,重组蛋白可被小鼠抗His-tag单克隆抗体特异性识别。生物信息学分析表明,SjIPP为胞内蛋白,含有多个磷酸化位点,B细胞表位丰富,且与人和小鼠的IPP高度同源。结论成功克隆表达出SjIPP,为进一步利用SjIPP奠定基础。