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不同信号肽对重组胰高血糖素样肽-1载体表达效率的影响

安徽医科大学学报 2013 07 v.48 764-768     字体:

基金项目:

作者:吴冬;刘尚全;袁媛;张维娜;李菲;

关键词:信号肽;;GLP-1;;基因表达

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.07.011

〔摘 要〕 目的观察不同信号肽对重组胰高血糖素样肽-1(GLP-1)分泌的影响,筛选高效表达GLP-1的信号肽。方法构建GFP-GCG-GLP-1、GFP-NT4-GLP-1、GFP-EX4-GLP-1重组质粒,根据信号肽不同分为阴性对照(NC)、空载、EX4、NT4和GCG组。使用Vigofect试剂盒转染HEK293T细胞;RT-PCR分析转染后HEK293T细胞GLP-1 mRNA表达水平;ELISA法测定转染后培养基上清液中GLP-1水平。结果转染24 h后HEK293T细胞,检测EX4、NT4、GCG组GLP-1mRNA水平差异无统计学意义,与NT4、GCG组比较,培养基上清液中EX4组GLP-1蛋白浓度升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 3种信号肽均能引导GLP-1分泌表达,EX-4信号肽引导效率最佳。