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EGF与CNTF基因共转染对脊髓损伤大鼠运动功能恢复的影响及机制探讨

安徽医科大学学报 2013 07 v.48 750-755     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:30973026)

作者:田丰;尹宗生;高维陆;张辉;张胜权;黄大可;

关键词:表皮生长因子;;睫状神经营养因子;;共转染;;脊髓损伤;;运动功能恢复

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.07.008

〔摘 要〕 目的研究表皮生长因子(EGF)与睫状神经营养因子(CNTF)基因共转染对脊髓损伤大鼠运动功能恢复的影响,并探讨其机制。方法 96只SD大鼠随机均分为EGF转染组(A组)、CNTF转染组(B组)、CNTF与EGF共转染组(C组)和对照组(D组)4组。采用改良Allen's法制备大鼠脊髓损伤模型,分别向A、B、C组和D组持续转染重组EGF与CNTF质粒和空白质粒各5μg。术后1、2、4、6周采用BBB运动功能评分系统检测大鼠运动功能恢复情况;采用RT-PCR和Western blot法检测EGF与CNTF基因的表达;采用免疫荧光双标染色和组织学观察EGF与CNTF对反应性星形胶质细胞增殖分化的影响以及脊髓组织病理变化情况。结果术后2、4、6周运动功能评分C组BBB评分明显高于其余3组(P<0.05)。RT-PCR和Western blot法检测显示A组大鼠脊髓组织可见EGF,B组可见CNTF mRNA与蛋白的表达,C组可见共同表达,而D组则未见明显表达。组织学观察示C组脊髓结构以及神经元形态恢复较好且逐渐趋于正常,且免疫荧光双标染色示C组脊髓组织中Nestin阳性的星形胶质细胞数较D组明显增多(P<0.05)。结论 EGF与CNTF基因能够促进脊髓损伤后星形胶质细胞逆分化,从而促进脊髓功能的修复。