基金项目: 国家自然科学基金(编号：81600844);;河北省高等学校科学技术研究项目(编号：QN2020438);;河北省医学科学研究重点课题计划(编号：20180745);;河北省省级科技计划项目(编号：H2017209114)
作者：谷营营;侯甜;秦雅芝;张妍;温国琛;毕文娟;董伟;
关键词：特立帕肽;;成骨细胞;;高糖;;Wnt3a/β-catenin
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.11.012
〔摘 要〕 目的研究特立帕肽(TPTD)通过Wnt3a/β-catenin通路对高糖环境下MC3T3-E1细胞向成骨分化的影响。方法实验分为5组：低糖组、低糖+TPTD组、高糖组、高糖+TPTD组、高糖+TPTD+G244-LM组。Calcein-AM染色及CCK-8法检测细胞增殖活性，碱性磷酸酶(ALP)及茜素红s染色观察细胞矿化结节形成情况，免疫荧光检测分析肌动蛋白形成情况，Real-time PCR检测Wnt3a、β-catenin、Tcf1、OPG、COLⅠmRNA表达情况。结果TPTD对高糖条件下MC3T3-E1细胞的增殖活性无显著影响。低糖+TPTD组细胞ALP染色区域、蛋白活性及茜素红s染色面积均高于其他四组(P<0.05),且高糖组低于低糖组(P<0.05),高糖+TPTD组高于高糖组和高糖+TPTD+G244-LM组(P<0.05)。低糖+TPTD组细胞骨架最清晰；高糖组和高糖+TPTD+G244-LM组细胞骨架清晰程度均低于高糖+TPTD组。低糖+TPTD组细胞Wnt3a、β-catenin、Tcf1、OPG、COLⅠmRNA水平最高(P<0.05);低糖组各基因mRNA水平均高于高糖组(P<0.05);高糖+TPTD组细胞各基因mRNA水平均高于高糖组和高糖+TPTD+G244-LM组(P<0.05)。结论高糖抑制成骨细胞分化，TPTD通过调控Wnt3a/β-catenin通路促进高糖环境下成骨细胞分化。