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当归补血总苷抑制TGF-β_1诱导的人胚肺成纤维细胞转分化及胶原表达

安徽医科大学学报 2011 10 v.46 1018-1022     字体:

基金项目: 国家自然基金青年科学资金资助项目(编号:30801535)

作者:刘干;李俊;高建;贾丽莎;

关键词:当归补血总苷;;胶原;;人胚肺成纤维细胞;;转化生长因子-β1

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2011.10.009

〔摘 要〕 目的研究当归补血总苷(TGDGBX)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HLF-Ⅰ)转分化及胶原表达的调控作用。方法体外培养HLF-Ⅰ,根据不同的处理方法分为5组,A组:对照组;B组:加入TGF-β1(1ng/ml);C组:加入TGF-β1(1 ng/ml)+TGDGBX(0.03 mg/ml);D组:加入TGF-β1(1 ng/ml)+TGDGBX(0.09 mg/ml);E组:加入TGF-β1(1 ng/ml)+TGDGBX(0.27 mg/ml)。MMT法检测各组HLF-Ⅰ的增殖情况,羟脯氨酸消化法检测细胞上清液中羟脯氨酸(HYP)含量,ELISA法检测细胞上清液基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的含量。半定量RT-PCR法检测Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)mRNA、Ⅲ胶原(COL-Ⅲ)mRNA、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA以及MMP-9 mRNA的表达情况。结果与B组相比,C、D、E组明显抑制TGF-β1诱导的HLF-Ⅰ细胞增殖(P<0.05);降低细胞上清液中HYP的含量(P<0.05);减少HLF-Ⅰ的COL-ⅠmRNA、COL-ⅢmR-NA以及α-SMA mRNA的表达(P<0.05);增加细胞上清液中MMP-9的含量(P<0.05)。D和E组与B组相比,显著提高HLF-Ⅰ的MMP-9 mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论 TGDGBX可抑制TGF-β1诱导的HLF-Ⅰ转分化和胶原表达,其抑制胶原表达的作用可能是通过增加MMP-9的表达来实现的。