基金项目: 国家自然科学基金(编号：81560265);;海南省自然科学基金(编号：821RC707)
作者：宋奇锋;高良辉;李望;张译中;
关键词：免疫抑制剂;;可溶性CD83;;耐受性DCs;;调节性T细胞;;核因子-κB亚基RelB;;吲哚胺2,3-双加氧酶
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.08.009
〔摘 要〕 目的 探索可溶性CD83(sCD83)发挥免疫抑制活性的分子机制。方法 分离6～8周龄C57B/6小鼠骨髓祖细胞培养骨髓衍生树突细胞(DCs)和脾脏内CD4~+ T细胞。分别向细胞培养物中加入10μl PBS处理(Control组)或10μl 10μg/ml的可溶性CD83处理(sCD83组)。流式细胞术测定DCs中的非成熟DCs(imDCs)和CD4~+ T细胞中的CD4~+ CD25~+ FOXP3~+ T细胞，即调节性T(T_(reg))细胞的细胞计数所占百分比。Western blot测定imDCs胞内吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的表达水平及T_(reg)细胞内磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、细胞核和细胞质核因子-κB亚基RelB和程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1)的表达水平。ELISA测定DCs培养上清液中犬尿酸的水平以及imDCs和CD4~+ T细胞共培养系统中白细胞介素(IL)-10、转化生长因子-β(TGF-β)和IL-12的水平。结果 与Control组相比，sCD83组表达表面标志物CD40、CD83、CD86、Ⅱ类主要组织相容性复合物(MHCⅡ)的DCs细胞计数所占百分比降低(P