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免疫磁珠纯化人呼吸道合胞病毒F蛋白方法的建立

安徽医科大学学报 2011 08 v.46 826-829     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:30972604);; 北京市自然科学基金(编号:7092053)

作者:方璇;何金生;唐亚宁;付远辉;王小波;郑妍鹏;

关键词:免疫磁化分离;;呼吸道合胞病毒,人

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2011.08.031

〔摘 要〕 目的利用免疫磁珠分离技术(IMS)建立快速纯化人呼吸道合胞病毒(RSV)融合蛋白(F)的方法。方法表达RSV F的重组腺病毒FGAd/F感染293细胞,收获细胞裂解液,利用兔抗人RSV多抗包被表面活化的免疫磁珠富集和纯化F蛋白,同时建立夹心ELISA,检测纯化的F蛋白浓度以及F蛋白的回收率。结果采用IMS成功纯化分子量为145~170 ku区间的二聚体RSV F蛋白,SDS-PAGE分析结果显示F蛋白得到很好的纯化,纯化所得RSV F蛋白浓度为116 mg/L,回收率为41.1%。结论利用IMS可有效地富集和纯化RSV F蛋白。