安徽医科大学学报
2023 07 v.58 1065-1070
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基金项目: 国家自然科学基金杰出青年基金项目(编号：82225009);国家自然科学基金面上项目(编号：32270941)
作者：黄紫薇;赵殿元;徐龙;唐丽;
关键词：肝星状细胞;;肝脏巨噬细胞;;肝窦内皮细胞;;报告基因小鼠;;Cre-LoxP
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.07.001
〔摘 要〕 目的 通过Cre-Loxp技术构建转基因小鼠，应用Lrat~(Cre)工具鼠示踪肝星状细胞分布。方法 将Lrat~(Cre)小鼠与H11~(LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)报告基因小鼠交配，通过PCR鉴定得Lrat~(Cre)H11~(LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)报告基因小鼠。固定小鼠肝脏切片，借助免疫荧光标记肝脏非实质细胞抗体，通过Imaris 3D还原分析肝星状细胞和其他肝脏非实质细胞间的表达与分布，以及进行肝星状细胞的自定位检验。结果 Lrat~(Cre)介导的红色荧光蛋白tdTomato的表达可以特异性标记肝星状细胞，并通过肝星状细胞与肝脏巨噬细胞、肝窦内皮细胞的免疫荧光定位为细胞间相互作用分析提供了途径。结论 Lrat~(Cre)可以介导tdTomato对肝星状细胞进行示踪，同时可用做肝星状细胞特异性的报告基因工具鼠。