〔摘　要〕 目的了解安徽省细菌耐药性监测中心收集的铜绿假单胞菌对常用15种抗菌药物的耐药情况,指导临床合理用药。对临床分离的14株铜绿假单胞菌的耐亚胺培南机制进行研究。方法安徽省细菌耐药性监测中心收集2006年9月份34所医院住院和门诊患者的各种临床送检标本,无重复分离的铜绿假单胞菌共236株。按美国临床及实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standard Institute,CLSI)推荐标准,采用M-H琼脂倍比稀释法对野生菌进行15种抗菌药物的体外药物敏感试验。针对14株耐亚胺培南铜绿假单胞菌,用协同试验筛选产金属酶菌株;聚合酶链反应检测金属酶基因IMP-1、IMP-2、VIM-1、VIM-2、SPM及外膜蛋白OprD基因;氰氯苯腙检测主动外排情况及其对亚胺培南最低抑菌浓度(Minimuminhibitory concentration,MIC)的影响。结果临床分离的236株铜绿假单胞菌在痰及呼吸道分泌物分布率最高,有155株,占65.7%,提示铜绿假单胞菌主要是以引起呼吸道感染为主;在体外药敏试验中,敏感率最高的前5种药物分别为美罗培南(90.3%)、亚胺培南(88.6%)、哌拉西林/他唑巴坦(78.0%)、阿米卡星(64.4%)、头孢他啶(64.0%);耐药率最高的前5种分别为头孢呋辛(98.3%)、头孢曲松(77.9%)、头孢噻肟(71.6%)、氨曲南(59.7%)、头孢西丁(59.2%)。4株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌同时对其它14种常用抗菌药物耐药率也很高,多重耐药率达100%;其中,5株产VIM-2型金属酶,且与纸片协同试验发现的5株相同,未发现产其它基因型金属酶;11株OprD基因检测阴性;2株在有氰氯苯腙存在时其对亚胺培南最低抑菌浓度(M IC)降低至原先的1/4,表明这2株有主动外排系统参与对亚胺培南的耐药。结论在体外药敏试验中,对临床常用15种抗菌药物中的大部分耐药率均较高,头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、氨曲南、头孢西丁都不适宜治疗临床上铜绿假单胞菌引起的感染;目前对铜绿假单胞菌感染的首选药物仍是碳青霉烯类和含酶抑制剂的β-内酰胺类和头孢菌素类抗菌药物,条件许可时可联合使用氨基糖苷类抗菌药物;临床应根据体外药敏试验结果合理选用抗菌药物,这是降低耐药铜绿假单胞菌产生的有效手段。本研究中发现OprD2蛋白表达缺失是我省引起铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因,其次为产VIM-2型金属酶和主动外排系统;纸片协同试验是一种准确、简单、经济、操作方便的检测金属酶的方法;14株耐亚胺培南铜绿假单胞菌均存在多重耐药现象;其中有4株(编号93、125、433、1451)存在两种耐亚胺培南的机制。