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重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的分离纯化工艺建立

安徽医科大学学报 2010 04 v.45 567-569     字体:

基金项目: 国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(编号:2007AA02Z158);; 国家科技重大专项资助项目(编号:2009ZX09102-210)

作者:张光满;秦宜德;于爱平;

关键词:重组融合蛋白质类/分离和提纯;;色谱法,离子交换

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2010.04.035

〔摘 要〕 目的建立大肠杆菌高密度表达的重组葡激酶-水蛭素融合蛋白(STH)分离纯化工艺。方法高密度培养重组大肠杆菌并诱导表达STH,离心收集菌体,反复冻融后收集上清液经超滤、两步阴离子交换层析,分离纯化STH目的蛋白。结果纯化后的STH纯度为98%以上,纤溶比活性2.6×104IU/mg,活性回收率56%。结论建立了STH的纯化工艺,该纯化工艺简便,时程短,重复性好,适合于大规模生产。