基金项目: 国家自然科学基金(编号:32171347);;上海交通大学医学院生物材料与再生医学研究院联合攻关项目(编号:2022LHA04);;上海交通大学医学院附属第九人民医院临床研究助推计划项目(编号:JYLJ202102)
作者:陈文泽;邹多宏;
关键词:褐藻多酚;;丝素蛋白;;复合膜;;定向冷冻;;成骨分化
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.06.001
〔摘 要〕 目的 通过制备负载褐藻多酚(PT)的双层丝素蛋白(SF)膜,测试其力学性能、生物相容性及其对成骨分化的影响,研究其作为引导骨再生屏障膜的可能性。方法 将不同脱胶时间处理后的SF溶液通过溶液浇筑技术、定向冷冻技术以及冷冻干燥技术处理后制备成SF双层膜,采用力学万能试验机测定湿态条件下各组膜样品(n=5)的抗拉强度。取抗拉强度最大的SF双层膜所对应的SF溶液重新制备膜样品,用扫描电镜观察其微观结构。通过在粗糙面负载PT制备PT-SF双层膜,使用傅里叶红外光谱仪分析PT与SF双层膜的相互作用。利用扫描电镜观察人牙槽骨来源的骨髓间充质干细胞(hABMSCs)在粗糙面的黏附情况,通过CCK-8及活死细胞染色探究PT-SF双层膜的生物相容性。用qRT-PCR法、ALP染色和茜素红染色检测各组hABMSCs的成骨向分化情况。结果 由脱胶时间为30 min的SF溶液制备出的SF双层膜的抗拉强度最大,达(3.293±0.122 8) MPa。SF双层膜的光滑面致密光滑,粗糙面呈纵向有序的疏松多孔结构。褐藻多酚通过氢键、疏水作用力等方式负载到SF双层膜的粗糙面上,空白组、SF组及PT-SF组之间的CCK-8及活死细胞染色结果均无明显差异,且与空白组和SF组相比PT-SF促进了hABMSCs的成骨向分化。结论 PT-SF双层膜兼具良好的机械性能和生物学性能,可在一定程度上促进hABMSCs的成骨向分化。该研究成功制备了PT-SF双层膜。