安徽医科大学学报
2009 04 v.44 522-524
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基金项目: 安徽省自然科学基金资助项目(编号:070413142)
作者:高显奎;余跃;李京培;王巧民;
关键词:胃;;细胞分离;;细胞培养技术;;免疫荧光技术
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2009.04.030
〔摘 要〕 目的探讨Balb/c小鼠胃Cajal间质细胞(ICC)的分离和培养方法,为进一步研究其生理特征及其与相关疾病的关系提供基础。方法无菌条件下取出小鼠胃组织,联合使用机械分离法和酶解法分离细胞,将细胞悬液接种于含有干细胞因子的M199培养基中进行培养。倒置显微镜下观察其形态,ICC特异的c-kit抗体进行免疫荧光染色后,用激光共聚焦显微镜进行鉴定。结果倒置显微镜下观察ICC有多个突起,突起较长并相互之间形成网络状。c-kit抗体荧光染色呈阳性。结论成功建立了一套小鼠胃ICC的分离培养方法。实验过程应当注意选择适当天龄的小鼠、尽量减小机械化学损伤、避免污染等问题。