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Sedlin蛋白稳定表达细胞株的建立

安徽医科大学学报 2008 06 v.43 612-615     字体:

基金项目: 安徽医科大学博士科研基金(编号:XJ2005004)

作者:朱恒锐;汪云飞;张庆慧;武标;邢昕;刘晓颖;范礼斌;

关键词:基因表达;;转染;;蛋白质类;;细胞株

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2008.06.005

〔摘 要〕 目的建立稳定表达Sedlin蛋白的细胞株,研究Sed-lin蛋白在细胞内的分布。方法扩增SEDL基因全长编码序列,经双酶切后克隆至真核表达载体pCDGFP中,将重组表达质粒转染至HEK293细胞,用G418筛选阳性克隆,荧光显微镜和Western blot检测Sedlin蛋白的表达,并观察Sedlin蛋白在HEK293细胞中的分布。结果经测序鉴定,成功构建了SEDL基因的真核表达载体,转染HEK293细胞后,Western blot检测,证明SEDL基因能够稳定有效的表达,荧光观察显示,Sedlin蛋白在细胞核和细胞质中都有表达。结论成功建立了稳定表达Sedlin蛋白的细胞株,Sedlin蛋白广泛分布于整个细胞中。