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重组人内抑素单克隆抗体的制备及初步鉴定

安徽医科大学学报 2008 05 512-515     字体:

基金项目: 教育部科学技术研究重点项目(编号:00178)12

作者:魏文杰;陈飞虎;沈际佳;廖法学;朱绍春;

关键词:抑制素类;;抗体,单克隆/生物合成

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2008.05.010

〔摘 要〕 目的制备抗重组人内抑素(ES)单克隆抗体(McAb)并进行鉴定。方法利用重组人ES为抗原,免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫小鼠的脾细胞与同源小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,间接ELISA法对细胞培养上清进行筛检,对能稳定分泌抗重组人ES的细胞株,进行扩大培养。体内诱生法制备腹水并对其初步鉴定。结果获得3B4、1D10、1G5、2D10,4株能稳定分泌抗重组人ESMcAb的杂交瘤细胞株,并对3B4和1D10两株给予鉴定,其免疫亚型为IgG2a、IgG3。腹水ELISA效价为10-6、10-5。通过蛋白免疫印迹法和免疫组化证明抗体有特异性和敏感性。结论成功制备分泌抗重组人ES的杂交瘤细胞株,为研究人ES的表达及相关领域奠定了基础。