安徽医科大学学报
2008 04 381-384
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基金项目: 安徽省自然科学基金项目(编号:050430705,01043716)
作者：陈孝宇;胡超杰;左莉;刘超;张素梅;胡若磊;朱华庆;周青;桂淑玉;汪渊;
关键词：转染;;基因表达;;肾肿瘤/遗传学
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2008.04.006
〔摘 要〕 目的构建Endocan真核表达载体pcDNA3.1-En-docan,转染犬肾小管上皮细胞MDCK,观察其在MDCK中的表达并初步分析其对骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法应用PCR从pET28-Endocan中扩增出Endocan cDNA全长序列,酶切后导入pcDNA 3.1/myc-his A多克隆位点,构建真核表达载体pcDNA3.1-Endocan;瞬时转染MDCK细胞,Western blot检测Endocan和OPN表达。结果经双酶切鉴定及测序分析表明Endocan已经克隆到pcDNA 3.1/myc-his A中。Western blot结果表明转染成功,Endocan表达量增加,且OPN随其而增加。结论Endocan可促进MDCK表达OPN。