基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:30670936)
作者:吕园园;黄燕;刘荣玉;
关键词:细胞低氧;;受体,糖皮质激素
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2008.04.003
〔摘 要〕 目的研究不同低氧时间培养下,人肺腺癌上皮A549细胞糖皮质激素受体α(GRα)和糖皮质激素受体β(GRβ)的表达。方法将A549细胞分成6组,低氧组(3组)和对照组(3组),分别放置于低氧小室(37℃,95%N2,5%CO2)和普通培养箱中(37℃,95%空气,5%CO2)培养。24h、48h、72h后收集细胞,运用倒置显微镜下拍摄照片、RT-PCR和免疫细胞化学方法观察缺氧对A549细胞数目、形态以及细胞内GRα、GRβ mRNA和蛋白表达的影响。结果①低氧组细胞形态发生显著改变,随着低氧时间的延长,细胞生长速度逐渐减慢,细胞肿胀变形逐渐加剧。②RT-PCR的结果显示:24hGRα mRNA表达水平低氧组(0.914±0.079)与对照组(0.883±0.208)比较略有降低,但差异无显著性(P>0.05);48、72hGRα mRNA表达水平低氧组(0.794±0.029、0.828±0.171)与对照组(1.054±0.120、1.187±0.173)比较显著降低,差异有显著性(P<0.05);24、48、72hGRβ mRNA表达水平低氧组(0.439±0.175、0.437±0.117、0.433±0.101)与对照组(0.429±0.140、0.443±0.114、0.553±0.110)比较差异无显著性(P>0.05)。③免疫细胞化学的结果显示:24hGRα蛋白表达水平低氧组与对照组比较无显著改变;48、72hGRα蛋白表达水平低氧组与对照组比较显著降低;24、48、72hGRβ的蛋白表达水平低氧组与对照组比较无显著改变。结论低氧可导致A549细胞GRα的mRNA和蛋白表达水平显著降低;低氧环境可能会影响糖皮质激素作用的发挥。