基金项目: 国家自然科学基金(编号:82173494、81874259)
作者:蔡曙阳;王慧;张雪松;左绪磊;马金茹;洪依婷;吴奇峰;朱启星;
关键词:三氯乙烯;;外泌体;;miR-30d-5p;;RHOB
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.05.003
〔摘 要〕 目的检测三氯乙烯药疹样皮炎(OMDT)患者血清外泌体中miR-30d-5p的表达水平及其与肝功能的相关性,再对miR-30d-5p进行生信分析并验证下游靶基因RHOB。方法收集6例OMDT患者和6例健康对照者血清样本提取血清外泌体。透射电镜、纳米粒子跟踪分析以及Western blot法对外泌体进行鉴定后提取miRNA,检测其中miR-30d-5p表达水平并与肝功能作相关性分析,用miRWalk及miRBD数据库预测miR-30d-5p的靶基因,进行功能聚类和途径富集分析,最后通过双荧光素酶报告基因实验验证靶基因RHOB。结果6例OMDT患者在发病高峰期时血清外泌体中miR-30d-5p表达水平明显降低(P<0.05),并且与肝功能指标丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰胺基转移酶水平均呈负相关(相关系数分别为:r s =-0.943,P=0.005;r s =-0.886,P=0.019;r s =-0.886,P=0.019)。生信分析及双荧光素酶报告基因实验显示RHOB是miR-30d-5p的直接靶基因。结论OMDT患者血清外泌体miR-30d-5p表达降低,与肝功能指标呈负相关,并且可能通过靶向RHOB参与三氯乙烯所致肝损伤过程。