安徽医科大学学报
2007 06 692-695
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基金项目: 国家自然科学基金(编号:30672475);; 安徽省自然科学基金(编号:070413078)
作者:张磊;黄成;李俊;吕雄文;朱鹏里;王建青;李增;贺晓昕;
关键词:枯否细胞;;细胞培养技术
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2007.06.027
〔摘 要〕 目的建立一种可以同时分离大鼠肝星状细胞(HSC)和枯否细胞(KC)的方法。方法选用SD大鼠,经胶原酶和蛋白酶灌注肝脏后,用18%Nycodenz密度梯度离心,分离大鼠HSC和KC,HSC处在界面,KC处在界面下。常规台盼蓝染色行细胞活力鉴定;荧光显微镜下观察自发荧光确定HSC的纯度;KC免疫细胞化学检测。结果成功分离大鼠肝星状细胞和枯否细胞,HSC得率为2×107/肝,KC得率为(3~6)×106/肝,活性>90%,纯度>90%。结论该方法建立的HSC和KC同时分离培养的方法,简单、易行、可靠,细胞纯度高,同时获得的细胞可保持良好的生物学性状。