安徽医科大学学报
2007 02 133-136
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基金项目: 安徽省自然科学基金项目(编号:05021018)
作者：韩雷;汪春兰;赵宇;何金生;王帮河;王兴宇;杨兵;周志林;
关键词：血管内皮生长因子类/遗传学;;骨形态发生蛋白质类/遗传学;;遗传载体;;基因表达
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2007.02.004
〔摘 要〕 目的构建人血管内皮生长因子(hVEGF121)和人骨形态发生蛋白-4(hBMP-4)的真核双表达质粒,转染COS-7细胞并表达。方法将hVEGF121 cDNA和hBMP-4通过非定向和定向克隆至真核双表达质粒pIRES中,重组质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4,经酶切鉴定后,转染COS-7细胞,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测。结果真核双表达载体pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4构建成功且hVEGF121cDNA和hBMP-4在COS-7细胞中得到了有效表达。结论hVEGF121和hBMP-4在COS-7细胞中成功表达,为进一步研究打下良好基础。