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日本血吸虫谷胱甘肽-S-转移酶在虫卵阶段的定位

安徽医科大学学报 2007 01 1-4     字体:

基金项目: 国家高技术研究发展计划(863计划)(编号:2004AA2Z3570);; 国家自然科学基金(编号:30571631)

作者:王志成;徐元宏;汪学龙;李敏;罗飞;郑美娟;罗庆礼;沈继龙;

关键词:血吸虫,日本;;血吸虫病/诊断;;寄生虫虫卵计数

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2007.01.001

〔摘 要〕 目的探讨谷胱甘肽-S-转移酶(Sj26GST)在虫卵阶段的表达、定位和重组蛋白(rSj26GST)的免疫诊断价值。方法从感染日本血吸虫尾蚴6周的兔肝脏中分离虫卵,分别用RT-PCR和免疫印迹(Western blotting)法检测Sj26GST基因在虫卵阶段的转录和翻译;同时用兔肝做免疫组化观察Sj26GST在虫卵内的分布。利用纯化的rSj26GST和日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA),采用间接ELISA法检测急、慢性血吸虫病患者和正常人血清。结果RT-PCR从血吸虫虫卵中扩增670bp的基因片断,Western blotting证明在虫卵阶段Sj26GST的表达;同时免疫组化显示Sj26GST主要分布在虫卵内毛蚴两边的侧腺。rSj26GST检测急、慢性血吸虫病患者和正常人血清的阳性率分别为92%、80%和0;用SEA检测以上标本,阳性率分别为96%、84%和2%。结论Sj26GST是SEA的主要组分之一,能刺激机体产生高滴度的抗体;rSj26GST为抗原诊断日本血吸虫病显示出高度的敏感性和特异性,具有实用价值。