基金项目: 教育部科学技术研究重点项目(编号:01052);; 安徽省“十五”生物医药重大科技专项(编号:01303003);; 安徽省教育厅自然科学基金资助项目(2006KJ320B)
作者:史永林;陈敬贤;王明丽;
关键词:巨细胞病毒/分离和提纯;;生物学鉴定法/方法;;序列分析,DNA
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2006.06.003
〔摘 要〕 目的鉴定从合肥市某医院先天性脑瘫患儿尿标本中分离的4株人巨细胞病毒(HCMV)毒株并对其UL83基因序列进行分析,为HCMV感染的预防及pp65蛋白疫苗的研制提供参考依据。方法应用细胞培养法复苏病毒,间接免疫荧光法检测pp65蛋白表达,并用特异性引物对UL83基因进行PCR,扩增的产物经凝胶纯化后测序;序列结果运用DNAMAN软件和GenBank登录的3株代表性HCMV毒株进行核苷酸和氨基酸序列比对。结果HCMVAD169株与HCMV-1分离株的UL83基因核苷酸及编码氨基酸序列的同源性均为100%,与其余3株的同源性也达99·26%~99·69%;4株HCMV分离株与Merlin株、Towne株在相应基因片段核苷酸及氨基酸的同源性最低的分别为98·95%,99·06%。结论UL83序列分析结果表明,HCMVUL83编码pp65蛋白的优势抗原决定簇氨基酸序列无变化。