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作者:梁佳玉;王玉美;方佳;杨雁;
关键词:成纤维细胞(MFB);;信号转导;;Smad;;转化生长因子TGF-β1
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2006.05.005
〔摘 要〕 目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠肌成纤维细胞(MFB)增殖及胞内Smad蛋白磷酸化的影响。方法TGF-β1(0·33~81pmol/L)在不同作用时间(5~120min)的条件下诱导MFB细胞活化,采用免疫吸附和Westernblot方法观察TGF-β1对MFB细胞内pSmad2C、pSmad2L、pSmad3L及Smad2/3蛋白表达的影响;采用MTT方法观察TGF-β1对MFB细胞增殖的影响。结果在0·33~9pmol/L浓度范围内,TGF-β1均呈浓度依赖性刺激MFB细胞内Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化,以9pmol/L最明显,TGF-β1在27、81pmol/L浓度时,Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化仍处于高水平状态,而各组Smad2/3蛋白表达无明显变化。在TGF-β1为9pmol/L浓度条件下,30~60min孵育时间对MFB细胞增殖无明显影响,但可呈时间依赖性刺激MFB细胞内Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化,以30min最明显,TGF-β1在60、120min时间时,Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化仍处于高水平状态,而各组Smad2/3蛋白表达量无明显变化。结论TGF-β1诱导MFB细胞内Smads磷酸化先于刺激细胞增殖。