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Tec真核表达载体构建及其对细胞信号的影响

安徽医科大学学报 2005 03 206-210     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:00044202,01043709);; 安徽省人才开发基金(编号:2002Z035)

作者:李菲菲,刘雷,郑红,周颖 ,余科科 ,程洁 ,王本忠,汪思应

关键词:肝再生;;蛋白质酪氨酸激酶

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2005.03.003

〔摘 要〕 目的构建人Tec酪氨酸蛋白激酶真核表达载体;研究Tec参与肝细胞再生的可能信号途径。方法经PCR扩增、酶切、连接等基因重组技术将人Tec插入pCDNA3.1(hismycTec)真核表达载体中,并经酶切、PCR、测序鉴定;用脂质体法将构建的真核表达载体瞬时转染Hela细胞,用Western方法检测Tec蛋白是否表达。用荧光素酶报告基因系统,检测Tec是否参与HGF刺激信号途径的活化。结果构建的Tec真核表达载体使Hela细胞高表达Tec蛋白;并发现Tec在HGF介导下,对Elk信号分子活化的报告质粒中荧光素酶的表达有明显增强作用。结论构建了Tec真核表达载体,并能使HGF介导的MAPK途径活化,提示Tec可能参与HGF介导肝细胞增殖的信号调控。