安徽医科大学学报
2004 01 22-25
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作者:赵宇,陆应麟,乔群,杜芝燕,徐元基,戚可名
关键词:干细胞;;骨髓细胞;;成纤维细胞;;脂细胞;;细胞分化
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2004.01.008
〔摘 要〕 目的 探讨体外培养的人骨髓间充质干细胞 (MSCs)向成骨细胞、脂肪细胞分化的方法 ,以及钙结节形成、Ⅰ型胶原表达等情况。方法 分离人骨髓间充质干细胞 ,经过原代培养和传代培养 ,分别加入成骨诱导、脂肪诱导培养体系 ,经过倒置显微镜观测与HE染色了解诱导后细胞形态变化 ,并通过vonKossa染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色、苏丹黑染色与油红O法染色鉴定细胞的性质。另取 2代细胞体外培养 ,加入成骨诱导分化试剂 ,以碱性磷酸酶 (ALP)为检测指标计数细胞阳性率 ,比较成骨诱导 1、2、3、4周时细胞碱性磷酸酶的变化。结果 体外培养的MSCs在合适的条件下能够向成骨细胞、脂肪细胞分化。细胞经成骨诱导 2~ 3周时细胞碱性磷酸酶阳性率最高 ,达到 85 %。结论 MSCs体外培养在一定条件下向成骨细胞、软骨细胞与脂肪细胞分化 ,体外培养时形成钙结节 ,并表达Ⅰ型胶原。培养 2~ 3周后细胞经成骨诱导分化细胞ALP阳性率较高