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膀胱移性细胞癌p16基因缺失、突变、甲基化及其蛋白表达的研究

安徽医科大学学报 2004 01 18     字体:

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作者:鲁文胜 ,汪渊

关键词:膀胱移性细胞癌;;膀胱癌;;聚合酶链反应(PCR);;免疫组织化学

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2004.01.006

〔摘 要〕 目的 对 2 5例膀胱移性细胞癌 (bladdertransitionalcellcarcinoma ,简称膀胱癌 )患者的p16基因第一、第二外显子纯合性缺失 ,第二外显子的点突变 ,第一外显子区 5 'CpG岛的甲基化情况及 p16蛋白表达进行检测 ,探讨 p16基因在膀胱癌中失活的方式及 p16蛋白表达与膀胱癌之间的关系。方法 取患者膀胱癌组织 ,用酚 /氯仿法提取癌组织基因组DNA ,设计p16基因第一、二外显子引物 ,采用聚合酶链反应(polymerasechainreaction ,PCR )、PCR 单链构象多态性(PCR singlestrandconformational polymorphism ,PCR SS CP)、甲基化敏感限制性内切酶 PCR分析方法 ,对 2 5例膀胱癌患者的癌组织基因组DNA的 p16基因第一、二外显子的纯合性缺失、第二外显子点突变及第一外显子区 5 'CpG岛的甲基化情况进行分析。应用S P免疫组织化学方法检测 2 5例膀胱癌和 6例正常膀胱黏膜组织中 p16基因的表达情况 ,并分析其意义。结果 在这 2 5例膀胱癌患者中 ,发现 p16基因第二外显子缺失者有 4例 ,第一外显子和第二外显子共同缺失者有 1例 ,第一外显子缺失者 1例 ,p16基因的缺失率为 2 4 % (6 / 2 5 ) ;未发现 p16基因第二外显子的点突变 ;p16基因第一外显子区 5 'CpG岛的甲基化率为 6 9 6 % (16 /2 3)。p16基因表达在膀胱癌组织中