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日本血吸虫磷酸丙糖异构酶编码基因的克隆与序列测定

安徽医科大学学报 2004 01 5-8     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金资助项目 (编号 :0 10 43 80 3,0 0 0 44 5 47)

作者:汪学龙,沈继龙,姚涌,江宝玲,蒋作君

关键词:血吸虫,日本/遗传学;;磷酸丙糖异构酶/遗传学;;序列分析;;基因文库

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2004.01.002

〔摘 要〕 目的 克隆和鉴定日本血吸虫磷酸丙糖异构酶 (SjT PI)编码基因 ,为寻找血吸虫病的候选疫苗联合应用打基础。方法 设计合成引物 ,抽提日本血吸虫成虫总RNA ,用RT PCR法从中扩增出SjTPI基因编码序列 ,将其克隆入pGEM T载体 ,用双酶切、以重组质粒为模板进行PCR扩增和测序进行鉴定。结果 RT PCR法从成虫总RNA中扩增出大小为 75 9bpSjTPI基因编码序列 ,重组质粒 pGEM SjT PI经双酶切、PCR扩增 ,均可获得一条与RT PCR产物一致的DNA片段 ,序列测定结果表明具有一个长度为 75 9bp的完整开放阅读框 ,与日本血吸虫 (菲律宾株 )和曼氏血吸虫磷酸丙糖异构酶核苷酸序列有高度同源性 (分别为 99%和88% )。结论 该实验成功地克隆了SjTPI编码基因 ,为进一步研究提供了条件。