基金项目: 国家“ 863”计划资助项目 (编号 :2 0 0 1AA2 15 0 5 1,2 0 0 2AA2Z3 3 0 9);; 国家自然科学基金资助项目 (编号 :3 0 170 85 6)
作者:徐容,潘卫,沈毅,陈秋莉,潘欣,冯春芝,戚中田,刘彦君,邓松华
关键词:噬菌体/遗传学;;质粒;;遗传载体;;肽库
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2004.02.001
〔摘 要〕 目的 进一步改造噬菌体展示载体 ,使之能更有效地展示各种外源随机多肽文库。方法 以 pCANTAB5X IFN α2b重组质粒为模板 ,在上游引物中引入XbaⅠ、SacⅠ酶切位点 ,在下游引物中引入SacⅠ、StuⅠ、SalⅠ酶切位点 ,将用该引物扩增的IFN α2b衔接片段PCR产物克隆到pMD18 T中 ,再将该片段用XbaⅠ和SalⅠ酶切并将之插入pCANTAB5L的XbaⅠ和SalⅠ位点中 ,经SacⅠ酶切 ,线性载体片段自连 ,构成新型噬菌体展示载体 pCANTAB5S。 结果 限制酶切位点SacⅠ被引入到噬菌体展示载体 ,并校正了pCANTAB5L载体StuⅠ、SalⅠ等位点的读框。结论 成功构建了含读框正确的SacⅠ等多个克隆位点的新型噬菌体展示载体pCANTAB5S ,可用于各种外源随机多肽文库的有效展示。