基金项目: 国家教育部科学技术研究重点项目 (编号 :0 10 5 2 );; 安徽省生物医药重大科技专项项目 (编号 :0 13 0 3 0 0 3 )
作者:方草晖,胡勇,张文艳,类延花,金晶,吴建军,王明丽
关键词:风疹病毒;;致细胞病变,病毒;;巨细胞
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2004.03.025
〔摘 要〕 目的 建立使风疹病毒 (RV)在Vero细胞 (非洲绿猴肾传代细胞株 )上产生的细胞病变效应 (CPE)易于观察的简便试验方法 ,以利于病毒的分离、培养与鉴定。方法 在RV接种Vero细胞 4天后 ,用不同 pH值 (4 0、4 5、5 0、5 5、6 0、7 0 )的融合营养液处理细胞 ,继续按常规条件培养 1天后 ,在倒置显微镜下观察RV引起的特征性CPE 多核巨细胞 ,染色后计数多核巨细胞的形成率。同时检测在不同条件(融合时间、病毒接种初始滴度 )下 ,多核巨细胞形成率的变化。结果 感染RV的Vero细胞经过酸性融合营养液的处理 ,可出现RV特征性CPE 多核巨细胞。发现在 37℃、pH5 0的酸性融合营养液处理染毒细胞 10min后 ,继续培养 1天 ,出现的细胞病变形态最典型 ,染色后计数发现多核巨细胞的形成率最高 ,为 14 7% (P <0 0 1)。融合处理的时间对多核巨细胞的形成率没有影响。随着病毒接种初始滴度的降低 ,多核巨细胞的形成率也相应降低。结论 此方法简单、易行 ,使RV在Vero细胞上产生的细胞病变清晰易观察。