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成年兔心耳组织体外培养扩增心肌细胞的生物学特性研究

安徽医科大学学报 2002 04 268-271     字体:

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作者:朱正艳,严中亚,翟志敏,汪健,周珞平,胡闻

关键词:心房;;心肌;;培养细胞;;兔

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2002.04.007

〔摘 要〕 目的 探讨成年兔心耳组织体外培养扩增心肌细胞的生物学特性。方法 选新西兰成年兔 11只 ,分别取少量心耳组织 ,酶解法制成细胞悬液 ,体外培养。于培养 0、12、2 6、4 0d进行细胞计数 ;培养 12、2 6d测定细胞染色体含量 ;培养 0、4 0d ,取部分细胞行免疫组化染色检查 ,计算心肌细胞百分比 ;培养 2 6d ,电镜检查细胞的超微结构 ;培养 12d ,取部分细胞置 - 80℃冷冻保存 ,8周后快速解冻 ,体外继续培养观察。结果 细胞计数分别为 (0 5 4± 0 0 6 )× 10 7、(7 38± 0 73)× 10 7、(5 8 0 0± 16 14 )× 10 7、(2 4 91± 11 86 )× 10 7;DNA含量测定S期细胞分别为 2 2 2 %、5 6 5 % ;免疫组化判定心肌细胞的比例分别为 82 %± 11%、87%± 18% ;电镜下可见心肌细胞肌原纤维的横纹 ;冷冻的心肌细胞快速解冻后 ,体外培养可继续生长扩增。结论 成年兔心耳组织来源的心肌细胞 ,在有限的体外传代培养过程中 ,数目可扩增 ,其亚显微结构和成分基本稳定。