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人巨细胞病毒先天性感染胎鼠大脑皮质钙调素基因mRNA表达的研究

安徽医科大学学报 2001 06 492     字体:

基金项目:

作者:陈贵海

关键词:巨细胞病毒;;感染/病理学;;钙调蛋白;;基因表达;;RNA信使;;鼠;;大脑皮质/病理学

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2001.06.035

〔摘 要〕 目的 研究先天性人巨细胞病毒 (HCMV)感染致脑损害后钙调素 (calmodulin ,CaM )基因mRNA表达的改变 ,以探讨先天性HCMV感染所致脑损害的机制。方法 选用 10周龄Balb/c小鼠 ,雌雄小鼠腹腔内分别注射 1 0ml、0 5ml、0 2 5mlHCMV后合笼交配以建立先天性HCMV中枢神经系统(CNS)感染小鼠模型 ,并以腹腔注射 1 0ml16 4 0液鼠为对照。剖腹取 2 1天胎龄小鼠大脑皮质 ,以自行设计的CaMcDNA编码区的一对引物与一条CaM特异性探针 ,分别用逆转录聚合酶链反应 (RP PCR)技术CaMmRNA相对含量 ,用原位杂交检测大脑皮质细胞内相应mRNA的表达及定位。结果 母鼠腹腔内接种HCMV量为 1 0ml与 0 5ml的临产胎鼠大脑皮质分离出相应病毒 ,病理学检查等确诊发现了侵袭性脑膜脑炎性病理改变 ,证实HCMV可以小鼠宫内传播至CNS。 1 0ml组与 0 5ml组胎鼠RT PCR产物浓度明显高于 0 2 5ml组及对照组 ,而 1 0ml组与 0 5ml组间亦有明显差异。电泳结果显示对照组与 0 2 5ml组胎鼠未见阳性条带 ,而 1 0ml组胎鼠特异性条带信号强于 0 5ml胎鼠 ,仅略低于同组母鼠。原位杂交显示CaMmR NA不但出现在 1 0ml组胎鼠大脑皮质大神经元胞核及胞浆内 ,在中小神经元及胶质细胞的胞核及胞浆亦有高密度表达 ,阳性细胞的突起中亦有弱信号存在。结论